.
Распространенность заболеваний пародонта увеличивается с возрастом. Существенный прирост данной патологии отмечен у женщин в пре- и постменопаузальном периоде. Постменопаузальный остеопороз является фактором риска заболеваний пародонта. Известно, что дефицит эстрогенов, характерный для постменопаузального остеопороза, ускоряет процессы ремоделирования, способствует возникновению дисбаланса между резорбцией и формированием костной ткани, ускоренной потере костной массы, развитию остеопороза и его осложнений. Применение препаратов кальция в комплексном лечении больных генерализованным пародонтитом способствует установлению положительного кальциевого баланса, снижению интенсивности обменных процессов в костной ткани. Доказана принципиальная роль витамина D в процессах регуляции дифференцировки и пролиферации преостеогенныхмезенхимальных клеток, а также в формировании костной ткани. Применение данных препаратов позволяет устранить отрицательный костный баланс, снизить секрецию паратиреоидного гормона.
Цель: изучить процессы ремоделирования костной ткани на модели экспериментального пародонтита у старых крыс-самок.
Объект исследования: Были подвергнуты анализу особенности регенерации костной у молодых и старых крыс-самок. Объектом исследования были 12 нелинейных крыс массой 200-250г.Животные были распределены на 3 группы по 4 особи в каждой:
1-ая группа – контроль:молодые животные возрастом 2-3 мес.
2 группа – старые животные возрастом 22-24 мес.
3 группа – старые(возрастом 22-24 мес.) с предварительным введением в рацион глюконата кальция и витамина Д3.
Животных содержали в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и лабораторному корму.
Метод воспроизведения экспериментального пародонтита (Воложин А.И. 2003): у наркотизированных гексеналом (75 мг/кг) и фиксированных на операционном столе животных делали кожный разрез на внутренней поверхности правого бедра размером 1,5-2 см, обнажали сустав, шаровидным бором № 9 при помощи бормашины проводили трепанацию медиальной части дистального эпифиза бедренной кости на глубину головки бора.Дефект заполнялся кровяным сгустком. Рана послойно ушивалась кетгутом.
Животных декапитировали под наркозом через 15-е, 30-е сутки после операции, бедренные кости выделяли и фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине. Данные сроки отражают основные этапы репаративногоостеогенеза.
Методы исследования: В сыворотке крови крыс проводили определение содержания общего белка, кальция(Са), фосфора неорганического (Фн) и активности щелочной фосфатазы(ЩФ). Материал для гистологического исследования фиксировали в 10%-м нейтральном водном растворе формалина, проводили обезвоживание в спиртах, заключение в парафин по общепринятой методике.Изготавливали срезы толщиной 7-8мкм, окрашивали, растворами гематоксилина Эрлиха и водно-спиртовым эозином.
Результаты: На ранних этапах (к 15-тымсуткампосленанесенияповреждения) развитиярепаративногоостеосинтезаумолодыхкрысотмечаетсяклеточнаяинфильтрация, полнокровие сосудов, стаз форменных элементов крови. В сыворотке крови снижется уровень общего белка и Са.
Это говорит о затухании острого воспалительного процесса в костной и окружающих мягких тканях и активации функции остеобластов. ПовышениесодержанияФнсвязаносегорезорбциейизкостнойтканиипоступлениювкровь.
На поздних этапах (к 30-тымсуткампосленанесенияповреждения) имеетместопролиферацияостеогенныхклеток, утолщениефиброзногослоянадкостницы, новообразованиекостнойтканисформированиемкостныхбалок. Всывороткекровиотмечаетсяповышениеуровняобщегобелкадоисходныхзначений, снижаетсяактивностьЩФиуровеньСа. Такоесоотношениевбелково-минеральномобменевпроцессерегенерациикостнойтканисоответствуетсуществующимбиологическимпредставлениямотом, чтовпервуюочередьформируетсябелковаяматрица, азатемидеткристаллизацияминеральныхвеществ.
Устарыхкрыснапозднейстадииразвитиярепаративногоостеосинтезаразвиваетсяочаговаяпролиферацияостеобластоввкостныхканалахнафонесохранениявыраженныхдистрофическихизмененийхрящевойтканиифиброза. Гистологическиеизменениякоррелируютсбиохимическимипоказателямивсывороткекрови: дажек 30-мсуткампоказателиЩФостаютсянизкиминафонесниженияобщегобелка, чтоговориторазвитииацидозавкостнойткани, по-видимому, преобладаниикислойфосфатазы, повышенииактивностиостеокластов, возникающихнафоневоспалительнойреакции.
Устарыхкрыс, врационкоторыхвтечениемесяцапредварительновводилсякальцийивитаминД3 поздняястадиярепаративногоостеосинтезахарактеризоваласьпоявлениемотдельныхучастковновообразованийкостнойткани, пролиферациейостеогенногослоянадкостницы, появлениемотдельныхучастковфиброза. Всывороткекровиотмечаетсяповышениеуровняобщегоуровнябелкаиактивностищелочнойфосфатазы
Предварительное введение в рацион старых животных кальция и витамина Д3 улучшает течение репаративных процессов в костной ране, что проявлялось ускорением образования более совершенного мягко-тканного, а затем и костного репарата. При этом наблюдалось повышение темпов и объема образования эндостального и периостальногорепараторных ростков.
Выводы:
1. Полученные результаты дают основание считать, что при воспроизведении экспериментальной модели пародонтита у крыс только к 30 суткам после нанесения повреждения можно проводить оценку степени активности репаративных процессов в костной ткани.
2. Изменения уровня кальция, фосфора неорганического, активности щелочной фосфотазы в сыворотке крови отражает метаболическое состояние остеобластов – клеток, отвечающих за формирование кости.
3. Предварительное введение в рацион питания в течение месяца у старых крыс глюконата кальция и витамина Д3 обеспечивает более полноценное восстановление костной ткани к 30 суткам от начала воспроизведения экспериментальной модели пародонтита.
1. Ершов К.И.Протеогликаны и минеральный состав костной ткани крыс в норме и при развитии остеопороза: дисс… к.б.н. – Новосибирск, 2008. – 144с.
2. Стрюкова Р.Л. Клинико-диагностические особенности течения стоматологических заболеваний у женщин в перименопаузе: дис.. к.м.н. – М., 2006. – 99с.
3. The RECORD Trial Group. Oral Vitamin D3 and calcium for secondary prevention of low–trauma fractures in elderly people (Randomised Evaluation of Calcium Or Vitamin D, RECORD): a randomised placebo–controlled trial. Lancet 2005; 365:1621–1628.
Таблица. Показатели белково-минерального обмена в сыворотке крови крыс при экспериментальном пародонтите
Группы крыс |
Общий белок- g/l |
Активность шелочной фосфатазы-u/l |
Общий Са- mmol/l |
Общий Фн- mmol/l |
Группа сравнения – молодые крысы |
82,62±1,07 |
160±4,03 |
2,3±0,01 |
1.58±0,04 |
экспериментальный пародонтит через 7-14 дней после воспроизведения |
78,36±0,92 |
195±1,25 |
0,88±0,01 |
2,69±0,48 |
экспериментальный через 30 дней после воспроизведения |
85,32±0,65 |
131±4,82 |
0,83±0,02 |
2,84±0,01 |
Группа сравнения – старые крысы |
79,94±0,53 |
153±5,18 |
2,11±0,05 |
1,35±0,06 |
экспериментальный через 7-14 дней после воспроизведения |
77,98±1,54 |
141±3,26* |
1,12±0,03* |
2,99±0,05 |
экспериментальный пародонтит через 30 дней после воспроизведения |
82,5±0,79* |
116±2,09* |
1,2±0,02* |
3,18±0,06* |
экспериментальный пародонтит через 7-14 дней после воспроизведения на фоне остеотропных препаратов |
82,0±0,56*# |
112±5,4*# |
1,17±0,06* |
2,9±0,04 |
экспериментальный пародонтит через 30 дней после воспроизведения на фоне остеотропных препаратов |
82,3±0,74* |
120±3,95 |
1,25±0,06* |
3,11±0,11* |
Примечание: *- показатели имеют достоверные различия по сравнению со значениями в группе старых и молодых крыс (р<0,05),
#- показатели имеют достоверные различия по сравнению со значениями в группе старых крыс, где не использовались остеотропные препараты(р<0,05).